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发布时间:2022-08-12 04:19:00 作者:精塞玛
PCR技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复 “变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。
普通的PCR仪
一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,又叫传统的PCR仪。
用途:主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。
(1)梯度PCR仪: 一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常为12种温度梯度的普通PCR仪。
用途:研究未知DNA退火温度的扩增。
(2)原位PCR:将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶DNA的定位分析,在细胞内实现基因扩增的普通PCR仪。
用途:用于在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。
1、良好的实验室管理中包含了对仪器的定期质控。
2、定期对PCR仪进行温度测定可以完善实验室的质量管理体系。
3、PCR仪的温度条件和状态对于PCR试剂盒的研发和应用来说,是的条件之一。
4、根据测温的结果可以避免某些试剂盒对某些特定品牌型号仪器的依赖,拓宽试剂盒的应用范围。
5、在合格的仪器上做实验可以极大的节约人力物力。
6、对于拥有老旧仪器和高强度使用的实验室来说,节省效果尤为明显。
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